乐键首页 | 走进乐键 | 新闻中心 | 产品展示 | 合作加盟 | 经营管理 | 培训教育 | 招聘专栏 | 联系我们留言
               

乐达生命口服液
功效范围
乐达Beta-1,3D葡聚胶囊
癌症研究报告
原发研究
临床验证
乐达泊奥金胶囊
乐达冰河元素
产品试验
乐达专用系列产品
妇科专科系列
消化问题系列
各类痛症系列
排毒系列
牙疹、皮疹专用
运动性创伤系列
日常保健系列
松驰及安眠系列
饮食健康系列
其它专用系列

 

   

 

探索性研究:口服酵母β1,3-葡聚糖预防性保护小鼠避免炭疽感染和癌

Vaclav Vetvicka, PhD, Kiyomi terayama, MD, Rosemonde Mandeville, MD, PHD, Pauline Brouseau, PhD, Bill Kournikakis, PhD, Gary Ostroff, PhD,

1肯塔基州,路易斯维尔,路易斯维尔大学,医学院,病理科
2东京牙科学院病理科
日本,基巴郡,Ichikawa General Sugano Ichikawa市
3加拿大,魁北克市,蒙特利尔,Biophage 制药公司
加拿大,艾伯塔,罗尔斯顿,国防研究所
明尼苏达州,伊根,生物聚合物工程公司

摘要

已经确定各种细菌、真菌、酵母和谷类来源的β1,3-葡聚糖可作为免疫调节剂。通过本文我们表明口服酵母β1,3-葡聚糖(WGP β葡聚糖)作为降低小鼠炭疽感染的致死率有显著效果。另外,同样类型的治疗也抑制活体内癌细胞的生长。其作用机理涉及对三种重音细胞因子的剌激:白细胞介素-2,干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α。这些结果提供口服酵母β1,3-葡聚糖起有利影响的临床前证据。

序言
文献报道β1,3-葡聚糖作为生物活性免疫调节剂已有40多年。首先导致对多糖的免疫调节特性的兴趣是在表明天然酵母细胞制剂通过激活补体系统而刺激巨噬细胞的实验后才引起的。

     进一步的工作查明免疫调节活性成分为β1,3-葡聚糖。随后大量的研究表明β1,3-葡聚糖,不论是颗粒形态还是可溶态,都有免疫刺激特性,包括抗菌和抗肿瘤活性。

    β1,3-葡聚糖几乎可从每一种酵母分离出。对源自酿酒酵母(面包师酵母)的β1,3-葡聚糖已经进行了广泛的研究。与甘露聚糖、蛋白质、类脂和少量甲壳质一起,β1,3-葡聚糖构成酵母细胞壁的重要部分。除酵母外,β1,3-葡聚糖也可从细菌、真菌、水藻或者谷粒中分离出。Β1,3-葡聚糖的结构取决于来源和分离类型。不同的物理化学的参数,如溶解性、一级结构、分子量和分支对β1,3-葡聚糖的生物活性有重要影响。

β1,3-葡聚糖对免疫系统影响的原发研究集中在小鼠。随后的研究表明β1,3-葡聚糖对其它广泛的种类,包括蚯蚓、虾、鱼、鸡、大鼠、兔、豚鼠、绵羊、猪、牛和人,都有很强的免疫刺激活性(见参考文献6综述)。根据这些结果,推断β1,3-葡聚糖呈现的免疫刺激类型是超越进化谱的,可能代表一种进化保守的遗传的免疫反应,直接对抗真菌致病体。
 

    800多篇文献已经报道β1,3-葡聚糖,不管是可溶解态还是颗粒态,都呈现免疫调节特性。尽管进行了广泛的研究,对β1,3-葡聚糖的来源、大小及其它特性还没有获得共识。另外,就给药浓度和途径方面已经进行了许多试验,包括腹膜内,皮下和静脉内给药。数十年来,用β1,3-葡聚糖进行口服治疗还不是主流,尽管它是最方便的给药途径。但在最近十年,人体应用的兴趣导致对β1,3-葡聚糖口服给药的重要研究。
    我们在本文报告在传染病和肿瘤动物模型中口服酵母β1,3-葡聚糖(WGP β葡聚糖)的活性。虽然已经确认β1,3-葡聚糖的抗感染特性,但大多数工作都是通过β1,3-葡聚糖胃肠外给药,而且受试的细菌种类很有限。由于新近的细菌恐怖威胁,我们检验了口服β1,3-葡聚糖对炭疽杆菌感染的效果。类似地,虽然已经明确β1,3-葡聚糖的抗肿瘤效果,但大多数工作都是通过β1,3-葡聚糖胃肠外给药,或者通过口服未提纯的真菌葡聚糖制剂。本研究检验口服高度提纯的酵母β1,3-葡聚糖对肿瘤生长的影响。

材料和方法
酵母β1,3-葡聚糖
    在所有试验中都采用高度提纯的颗粒状酵母来源的β1,6-支链β1,3-葡聚糖(明尼苏达州,伊根,生物聚合工程公司,ImucellTM WGP β葡聚糖)。按规定浓度将葡聚糖混悬在水中。

细菌

??? Vollum 1B株炭疽杆菌(马里兰州,德特里克,USAMRIID)用于制备芽孢,先从血琼脂平板收集,后热震(80oC,11分)。用磷酸质缓冲盐水(PBS)稀释的各等分存放在80oC。使用稳定的小鼠炭疽感染模型。
 

小鼠

   从魁北克,圣康思腾,夏尔河实验室购买6周大的雌性BALB/c小鼠,或者从Clea日本公司购买6周大的雄性BALB/c小鼠。对炭疽菌的实验,小鼠供养在德尔生物安全级别为3的实验室中。小鼠的监护和处理遵循加拿大动物养护委员会制定的指导方针。

肿瘤细胞株

  小鼠肠肿瘤细胞株Colon 26在BALB/c小鼠活体内传代。11接种21天后,切除肿瘤,小心梳理到不锈钢筛上,用RPMI 1640培养基洗,重新用磷酸质缓冲盐水(PBS)悬浮(1 x 106活细胞/毫升).

炭疽预防药的影响

    实验组(10小鼠/组)每天(从-7日至0日)用0.1毫升水(含0,2 mg/kg或20 mg/kg的WGP Β葡聚糖)灌胃。在第0日,最后一次灌胃60分钟后,用LD60剂量的85+11炭疽芽孢/动物皮下注射感染小鼠。将0.1毫升同样的混悬物接种在血琼脂平板中对剂量进行确认。. 所有的动物感染后连续10天,每天观察两次。在第10天,致死率稳定,实验结束。

抗肿瘤效果

在第0天,将肿瘤细胞(0.1毫升,含1 x 105活细胞)注入所有动物的腹壁。各组小鼠(8小鼠/组)连续21天每天用水或WGP β葡聚糖(28.4 mg/kg)灌胃(1-21日)。21天后处死接种肿瘤的动物,切下肿瘤称重。
 

化学品

胎牛血清和RPMI 1640培养基从Gibco BRL(马里兰州,洛克维尔)购买;HEPES,刀豆素A和脂多糖从Sigma(密苏里州,圣路易斯)购买。

细胞因子

为评估细胞因子的生产,我们将从每个动物的纯净脾脏细胞(2 x 106细胞/毫升,在含5%FCS 的RPMI 1640培养基中)孵育在24井的组织培养平碟的井中。在每井添加1 μg刀豆素A或者10μg LPS后,将细胞在湿润孵育箱中孵育72小时(37oC, 5% CO2 ). 在温孵终点,收集上清液,通过0.45 μm 过滤器,检测白细胞介素-2,干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α的存在。细胞因子水平按照CytoscreenTM BioSource 国际公司(加利福尼亚州,卡马里略)的流程用酶联免疫吸附测定法检测。
 

结果

表明口服WGP β葡聚糖治疗显示显著的预防炭疽和抗感染效果。在我们的实验条件下,10只对照小鼠中有5只感染炭疽后存活。与50%的对照组生存率比较,每日口服预防剂量(2或者20 mg/kg)的WGP β葡聚糖使存活率提高至100%(图A)。

还表明口服WGP β葡聚糖治疗对肿瘤增大和血管新生也有对抗作用(图B)。表1显示口服WGP β葡聚糖对肿瘤重量的影响。
 

    已经表明β1,3-葡聚糖可增加淋巴细胞生产、提高自然杀伤淋巴细胞活性和激活巨噬细胞。若干研究还表明细胞因子在抑制肿瘤生长方面的作用;此外,对肿瘤坏死因子a的释放6以及白细胞介素-1β(也因β1,3-葡聚糖而增加)所起的作用也倍受关注。已证明白细胞介素1β加强骨髓多型核白细胞的活力及其趋化能力。另外,白细胞介素-1β增加淋巴细胞数目以及加强其活性。

使用β1,3-葡聚糖对于经化疗和(或)放疗的肿瘤病人有特殊意义,由于β-葡聚糖可使亚致死量和致死量放射小鼠血象的恢复加速,甚至在放射后给药亦然。它还刺激化疗后骨髓的康复,限制肿瘤的生长以及防止治疗期间的感染并发症。

尽管维特维奇卡及其同仁研究所提供的数据还是初步的,尚待更大规模的对照试验证实,这仍然是一份重要的探索性研究,表明口服β1,3D-葡聚糖在治疗感染和肿瘤方面都有效
 
 
上一页
下一页

 


                                               
                                                 广州市乐键生物科技有限公司
                                         地址:广州市越秀区三育路23号第二幢21122房
                                        电话:020-87619815   邮箱:lejian818@163.com
                                              网址:http://www.lejian818.com